ИММУНОПРОТЕОСОМА КАК МИШЕНТ ДЛЯ СОЗДАНИЯ ИННОВАЦИОННЫХ ЛЕКАРСТВЕННЫХ ПРЕПАРАТОВ

^ ИММУНОПРОТЕОСОМА КАК МИШЕНТ ДЛЯ Сотворения Инноваторских Фармацевтических ПРЕПАРАТОВ ДЛЯ Исцеления НЕЙРОДЕГЕНЕРАТИВНЫХ Болезней А.Г.Габибов1, Н.А.Пономаренко1, В.Д.Кнорре1, А.А.Белогуров1, И.В.Смирнов1, И.Н.Куркова1, Д.Г ИММУНОПРОТЕОСОМА КАК МИШЕНТ ДЛЯ СОЗДАНИЯ ИННОВАЦИОННЫХ ЛЕКАРСТВЕННЫХ ПРЕПАРАТОВ.Илюшин1, Я.А.Ломакин1, А.В.Степанов1, А.А.Юдин2, А.И.Алехин2, О.П.Миронова2

1)Учреждение Русской академии институт биоорганической химии имени академиков М.М.Шемякина и Ю.А.Овчинникова РАН

2) Центральная клиническая поликлиника ИММУНОПРОТЕОСОМА КАК МИШЕНТ ДЛЯ СОЗДАНИЯ ИННОВАЦИОННЫХ ЛЕКАРСТВЕННЫХ ПРЕПАРАТОВ РАН


Нейродегенеративные аутоиммунные процессы относятся к практически неизученным патологиям как в плане патогенеза, так и терапии. Они затрагивают довольно широкую группу взрослого трудоспособного населения. Одним из более важных патологий этой группы является растерянный склероз ИММУНОПРОТЕОСОМА КАК МИШЕНТ ДЛЯ СОЗДАНИЯ ИННОВАЦИОННЫХ ЛЕКАРСТВЕННЫХ ПРЕПАРАТОВ, характеризующийся разрушением миелиновой оболочки, что в свою очередь приводит к деградации нервных волокон. Это болезнь носит приобретенный нрав и сопровождается глубочайшей нейродегенерацией. До сего времени неизвестен триггерный механизм его пуска.

Осуществлено выделение ИММУНОПРОТЕОСОМА КАК МИШЕНТ ДЛЯ СОЗДАНИЯ ИННОВАЦИОННЫХ ЛЕКАРСТВЕННЫХ ПРЕПАРАТОВ личных конститутивных 20S, 26S протеасом и иммунопротеосомы из тканей мышей хроматографическими способами: гель-фильтрация и ионообменная хроматография в режиме FPLC, аффинная хроматография на носителе с иммобилизованными антителами с применением ультрацентрифугирования ИММУНОПРОТЕОСОМА КАК МИШЕНТ ДЛЯ СОЗДАНИЯ ИННОВАЦИОННЫХ ЛЕКАРСТВЕННЫХ ПРЕПАРАТОВ на последних стадиях чистки. Разработанная методика не имеет аналогов в мировой литературе и позволяет достигать больших степеней чистки протеасомы при наименьшем числе стадий, что принципиально для нестабильного 26S комплекса.

Проведена характеризация протеолитических параметров протеасом ИММУНОПРОТЕОСОМА КАК МИШЕНТ ДЛЯ СОЗДАНИЯ ИННОВАЦИОННЫХ ЛЕКАРСТВЕННЫХ ПРЕПАРАТОВ по коммерческим низкомолекулярным флуорогенным субстратам (химотриптическая, триптическая и каспазоподобная активность). При помощи изотопно-меченых пептидов осуществлен анализ механизма деградации фрагментов основного белка миелина конститутивной и иммунопротеосомой, индуцированной в процессе развития аутоиммунного нейродегенеративного ИММУНОПРОТЕОСОМА КАК МИШЕНТ ДЛЯ СОЗДАНИЯ ИННОВАЦИОННЫХ ЛЕКАРСТВЕННЫХ ПРЕПАРАТОВ процесса экспериментального аутоиммунного энцефаломиелита (ЕАЕ). Осуществлено исследование кинетических черт протеасом. Проведена стандартизация кинетических данных. Проведен скрининг субстратов для селективного определения активности стандартной 26S и иммунопротеосомы из библиотеки веществ, синтезированных ИММУНОПРОТЕОСОМА КАК МИШЕНТ ДЛЯ СОЗДАНИЯ ИННОВАЦИОННЫХ ЛЕКАРСТВЕННЫХ ПРЕПАРАТОВ в лаборатории-заявителе. Изучена каталити-ческая активность конститутивной и иммунопротеосомы с внедрением разных О18 меченых фрагментов основного белка миелина (ОБМ). Предложены методы получения новых субстратов, более подходящих для селективного определения конститутивной и иммунопротеосомы. Получена черта ИММУНОПРОТЕОСОМА КАК МИШЕНТ ДЛЯ СОЗДАНИЯ ИННОВАЦИОННЫХ ЛЕКАРСТВЕННЫХ ПРЕПАРАТОВ протеолитических параметров всех протеасом по белковому субстрату – основному белку миелина. Проведено определение веб-сайтов и скорости протеолиза белка протеасомами 3-х типов. В научной литературе нет данных о веб-сайтах ИММУНОПРОТЕОСОМА КАК МИШЕНТ ДЛЯ СОЗДАНИЯ ИННОВАЦИОННЫХ ЛЕКАРСТВЕННЫХ ПРЕПАРАТОВ деградации ОБМ протеасомой, отсутствуют сведения и о сопоставлении скоростей протеолиза различными протеасомами. Демонстрация количественных данных по «выщеплению» фрагментов энцефалитогенных пептидов при помощи протеасомы и сопоставление с такими для иммунопротеосомы. Проведено исследование воздействия убиквитинили-рования ИММУНОПРОТЕОСОМА КАК МИШЕНТ ДЛЯ СОЗДАНИЯ ИННОВАЦИОННЫХ ЛЕКАРСТВЕННЫХ ПРЕПАРАТОВ основного белка миелина на скорость его протеолиза и на изменение положения веб-сайтов протеолиза. Применение таких современных способов, как обращенно-фазовая ВЭЖХ и MALDI масс-спектрометрия, позволили в первый раз сопоставить сайт-специфичность ИММУНОПРОТЕОСОМА КАК МИШЕНТ ДЛЯ СОЗДАНИЯ ИННОВАЦИОННЫХ ЛЕКАРСТВЕННЫХ ПРЕПАРАТОВ и скорость деяния различных протеасом на убиквитинилированный и не убиквитинилированный ОБМ. Верификация приобретенных данных при помощи меченых фрагментов ОБМ. Продемонстрирована кроссреактивность антител, получен-ных из библиотеки генов иммуноглобулинов с нейроантигенами и вирусными ИММУНОПРОТЕОСОМА КАК МИШЕНТ ДЛЯ СОЗДАНИЯ ИННОВАЦИОННЫХ ЛЕКАРСТВЕННЫХ ПРЕПАРАТОВ белками. Высказана концепция индукции РС вирусными агентами. Представлены данные по дизайну генно-инженерных векторов, направленных на элиминацию аутореактивных В-клеток.

^ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНО-ТЕОРЕТИЧЕСКОЕ Исследование МЕХАНИЗМА Неверного СВОРАЧИВАНИЯ БЕЛКОВ И СВЯЗЬ ЭТОГО ПРОЦЕССА С ИММУНОПРОТЕОСОМА КАК МИШЕНТ ДЛЯ СОЗДАНИЯ ИННОВАЦИОННЫХ ЛЕКАРСТВЕННЫХ ПРЕПАРАТОВ Заболеваниями, СВЯЗАННЫМИ С АМИЛОИДООБРАЗОВАНИЕМ ^ О.В.Галзитская, Н.В.Довидченко, Н.С.Катина, В.А.Балобанов, Н.Б.Ильина, М.Ю.Суворина, А.К.Сурин, О.М.Селиванова, В.Е ИММУНОПРОТЕОСОМА КАК МИШЕНТ ДЛЯ СОЗДАНИЯ ИННОВАЦИОННЫХ ЛЕКАРСТВЕННЫХ ПРЕПАРАТОВ.Бычкова

Институт белка РАН, Пущино


Основная цель данного исследования – добиться более глубо-кого осознания молекулярных устройств появления амило-идных заболеваний. Известными амилоидными заболеваниями являются: заболевания Паркинсона, Гентингтона и Альцгеймера, синдромы Дауна, прионовые заболевания, сосудистая деменция ИММУНОПРОТЕОСОМА КАК МИШЕНТ ДЛЯ СОЗДАНИЯ ИННОВАЦИОННЫХ ЛЕКАРСТВЕННЫХ ПРЕПАРАТОВ, множественная систем-ная атрофия, миотропный латеральный склероз, эпилепсия и другие. Сочетание теоретических пророчеств с эксперименталь-ными исследовательскими работами является преимуществом данного проекта, что позволяет выявить причины, которые оказывают влияние на неверное ИММУНОПРОТЕОСОМА КАК МИШЕНТ ДЛЯ СОЗДАНИЯ ИННОВАЦИОННЫХ ЛЕКАРСТВЕННЫХ ПРЕПАРАТОВ сворачивание белковых структур. Существует много работ, посвя-щенных исследованию образования амилоидов различными белками в хороших друг от друга критериях. Но до сего времени не удается выстроить подробную поэтапную картину перестроек, происходя-щих ИММУНОПРОТЕОСОМА КАК МИШЕНТ ДЛЯ СОЗДАНИЯ ИННОВАЦИОННЫХ ЛЕКАРСТВЕННЫХ ПРЕПАРАТОВ с белками во время образования амилоидных структур. Не-смотря на насыщенные исследования фибриллогенеза инсулина, нет принятой схемы процесса формирования зрелых фибрилл. Главные трудности появляются при интерпретации данных о начале процесса фибрилляции. Полимеризация инсулина ИММУНОПРОТЕОСОМА КАК МИШЕНТ ДЛЯ СОЗДАНИЯ ИННОВАЦИОННЫХ ЛЕКАРСТВЕННЫХ ПРЕПАРАТОВ начинает-ся при переходе нативной конформации мономера белка инсулина в отчасти развернутую амилоидогенную конформацию. Мощная зависимость процесса полимеризации от разных наружных воздействий приводит к образованию фибрилл инсулина разной морфологии, что ИММУНОПРОТЕОСОМА КАК МИШЕНТ ДЛЯ СОЗДАНИЯ ИННОВАЦИОННЫХ ЛЕКАРСТВЕННЫХ ПРЕПАРАТОВ усложняет конкретную интерпретацию метода полимеризации фибрилл. Нами предложена кинетическая модель для описания процесса амилоидообразования, включающая в себя нуклеационный механизм полимеризации с поочередным присоединением мономеров к олигомеру и автокаталитический рост амилоидных агрегатов ИММУНОПРОТЕОСОМА КАК МИШЕНТ ДЛЯ СОЗДАНИЯ ИННОВАЦИОННЫХ ЛЕКАРСТВЕННЫХ ПРЕПАРАТОВ, под которым предполагаются все типы экспоненциального роста: ветвление, дробление и рост с поверхности. Проведены компьютерные симуляции для 2-ух типов экспоненциального роста: дробление и роста с поверхности. Нами исследован процесс амилоидообразования на примере рекомбинантного инсулина человека ИММУНОПРОТЕОСОМА КАК МИШЕНТ ДЛЯ СОЗДАНИЯ ИННОВАЦИОННЫХ ЛЕКАРСТВЕННЫХ ПРЕПАРАТОВ и его аналога (LysPro). Показано, что инсулин и его аналог LysPro (подмена в цепи В остатков Pro28 и Lys29 местами) имеют похожую картину формирования амилоидных структур, что согласуется с теоретическими ИММУНОПРОТЕОСОМА КАК МИШЕНТ ДЛЯ СОЗДАНИЯ ИННОВАЦИОННЫХ ЛЕКАРСТВЕННЫХ ПРЕПАРАТОВ пророчествами. В истинной работе в избранных нами критериях мы смотрим в конце лаг-периода фибриллы с поперечником 3-4 нм. Такие фибриллы сравнивают вместе латерально (суперфибриллярная агрегация фибрилл), и при всем этом нередко ИММУНОПРОТЕОСОМА КАК МИШЕНТ ДЛЯ СОЗДАНИЯ ИННОВАЦИОННЫХ ЛЕКАРСТВЕННЫХ ПРЕПАРАТОВ наблюдаются пучки с ровненькими краями (отлично приметно на маленьких фибриллах). В таких пучках отдельные фибриллы ровно уложены и имеют схожую длину. Это может указывать на то, что отдельная фибрилла сформировывает поверхность, которая провоцирует фактически сходу ИММУНОПРОТЕОСОМА КАК МИШЕНТ ДЛЯ СОЗДАНИЯ ИННОВАЦИОННЫХ ЛЕКАРСТВЕННЫХ ПРЕПАРАТОВ сборку на ней последующей фибриллы. Аппроксимация экспериментальных данных показала, что модель корректно обрисовывает наблюдаемые в опыте стадии роста амилоидных фибрилл и что присутствие члена, описывающего в модели стадию экспоненциального роста, критично ИММУНОПРОТЕОСОМА КАК МИШЕНТ ДЛЯ СОЗДАНИЯ ИННОВАЦИОННЫХ ЛЕКАРСТВЕННЫХ ПРЕПАРАТОВ для верного моделирования появления лаг-периода.

Кинетика образования амилоидов мутантными формами апомиоглобина с подменами в положениях Leu115 и Glu109 исследована в критериях разрешенной для клеточки температуры 40 оС. При помощи ЭМ ИММУНОПРОТЕОСОМА КАК МИШЕНТ ДЛЯ СОЗДАНИЯ ИННОВАЦИОННЫХ ЛЕКАРСТВЕННЫХ ПРЕПАРАТОВ выявлена морфология амилоидных структур.



in-brief-dopolnitelnie-materiali-k-uchebniku.html
in-great-britain-and-russia.html
in-russian-language-space-ydiagileva-poetry.html